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福建省水產(chǎn)技術(shù)推廣總站技術(shù)服務(wù)競爭性談判公告。現(xiàn)邀請全國供應(yīng)商參與投標(biāo),有意向的單位請及時(shí)聯(lián)系項(xiàng)目聯(lián)系人參與投標(biāo)。
一、項(xiàng)目基本情況 項(xiàng)目名稱:大黃魚錐體蟲病加密監(jiān)測項(xiàng)目技術(shù)服務(wù) 采購方式:競爭性談判
預(yù)算金額:9.(略)(人民幣)? 最高限價(jià)(如有):9.(略)(人民幣) 采購需求:詳見
附件 本項(xiàng)目不接受聯(lián)合體投標(biāo)?! 《?、申請人的
資格要求 1.滿足《中華人民共和國政府采購法》第二十二條規(guī)定; 2.本項(xiàng)目的要求:(1)熟悉了解我站水生動(dòng)物疫病監(jiān)測、病原菌耐藥性監(jiān)測、CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可等相關(guān)工作。(2)
供應(yīng)商須提交以下
資質(zhì)證明文件:①供應(yīng)商須在中華人民共和國境內(nèi)(略),具有獨(dú)立法人資格,并提供合格有效的法人營業(yè)執(zhí)照副本復(fù)印件、稅務(wù)登記證副本復(fù)印件、組織機(jī)構(gòu)代碼證副本復(fù)印件。若已三證合一的企業(yè)可只提供營業(yè)執(zhí)照副本復(fù)印件。②提交項(xiàng)目
報(bào)價(jià)單。③具有技術(shù)服務(wù)、技術(shù)開發(fā)等相關(guān)證明文件?! ∪?、
響應(yīng)文件提交 截止時(shí)間:(略)年(略)月(略)日(略)點(diǎn)(略)(北京時(shí)間) 地址:(略) 時(shí)間:(略)年(略)月(略)日(略)點(diǎn)(略)(北京時(shí)間) 地址:(略)、公告期限 自本公告發(fā)布之日起(略)日。 六、其他補(bǔ)充事宜 無 七、凡對本次采購提出詢問,請按以下方式聯(lián)系 名稱:(略)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站 地址:(略) ?。裕┧a(chǎn)技術(shù)推廣總站 ?。裕┠辏裕┰拢裕┤铡 「郊 ∫?、采購需求名稱單位數(shù)量常規(guī)測序-PCR未純化測序R(略)N(略)DNA合成,PAGE合成(略)-(略)個(gè)堿基?2ODBAS(略)DNA合成,HPLC合成(略)-(略)個(gè)堿基?2ODBAS(略)DNA合成,雙標(biāo)記修飾?5`6-FAM,3`BHQ(略)ODPCS7雙標(biāo)記修飾?5`VIC,3`BHQ(略)ODPCS7?HE染色服務(wù)樣(略)透射電鏡樣3掃描電鏡樣3 二、服務(wù)內(nèi)容、形式和要求 1.服務(wù)內(nèi)容 甲方委托乙方進(jìn)行如下技術(shù)服務(wù): 1.1測序:包括PCR產(chǎn)物、菌液和質(zhì)粒測序服務(wù)?! ?.2引物合成:包括普通PCR引物合成(DNA合成,PAGE合成(略)-(略)個(gè)堿基?2OD);熒光定量PCR引物合成(DNA合成,HPLC合成(略)-(略)個(gè)堿基?2OD);引物修飾(DNA合成,雙標(biāo)記修飾?5`6-FAM,3`BHQ(略)OD、雙標(biāo)記修飾?5`VIC,3`BHQ(略)OD);引物純化(HPLC純化?1-(略)個(gè)堿基?2OD)?! ?.3HE染色服務(wù): 1.3.1脫水、透明、浸蠟:用酒精脫去組織中的水(略),再用二甲苯等透明劑透明,最后用石蠟將組織包埋成硬塊?! ?.3.2切片與貼片:用切片機(jī)將蠟塊切成幾微米厚的薄片,貼在載玻片上?! ?.3.3脫蠟至水:將玻片依次放入二甲苯和梯度酒精中,去除組織中的石蠟,并讓組織回到水環(huán)境?! ?.3.4染色: 蘇木精染核:將玻片放入蘇木精染液中浸泡數(shù)(略)鐘,細(xì)胞核被染成藍(lán)色?! 。裕┗c返藍(lán):用酸酒精溶液洗去多余的蘇木精((略)化),然后用弱堿性水(如Scott水)使蘇木精的顏色變得更鮮明、穩(wěn)定(返藍(lán))?! ?.3.5伊紅染胞質(zhì):將玻片放入伊紅染液中浸泡較短時(shí)間,細(xì)胞質(zhì)等被染成粉紅色。 1.3.6脫水、透明、封片:再次用梯度酒精脫水,二甲苯透明,最后用中性樹膠蓋上蓋玻片封存?! ?.4透射電鏡: 1.4.1樣品制備 ?。?)脫水:使用梯度乙醇或丙酮進(jìn)行脫水: ?。?)樹脂滲透與包埋:將樣品逐步浸入環(huán)氧樹脂(如Epon(略)或Spurr'sresin)中:樹脂:丙酮=1:3→1:1→3:1,最后純樹脂,每步數(shù)小時(shí)至過夜。將樣品放入膠囊中,加入新鮮樹脂,在(略)℃烘箱中聚合(略)-(略)小時(shí),形成硬塊?! ?.4.2超薄切片 (1)修塊:用玻璃刀或金剛石刀對樹脂塊進(jìn)行修(略),暴露出感(略)域(如細(xì)胞核、線粒體等)?! 。?)超薄切片:使用超薄切片機(jī)(Ultramicrotome)將樹脂塊切成厚度為(略)-(略)nm的超薄切片。切片漂(略)(常用(略)目)撈起?! ?.4.3染色(增強(qiáng)對比度) ?。?)鈾染(略)浸泡在醋酸雙氧鈾(Uranylacetate,2%-5%)中(略)-(略)鐘(避光)。鈾離子結(jié)合核酸和蛋白質(zhì),提高電子散射能力。 ?。?)鉛染:再用檸檬酸鉛(Leadcitrate)染色5-(略)鐘(避免CO?影響,可用NaOH干燥劑)。鉛離子增強(qiáng)膜結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器的對比。 1.4.4透射電鏡觀察 ?。?)上(略)放入TEM樣品臺,抽真空后送入鏡筒?! 。?)參數(shù)設(shè)置:加速電壓:通常為(略)-(略)kV(生物樣品),材料科學(xué)中可達(dá)(略)-(略)kV。聚焦、調(diào)(略)亮度和對比度,選擇合適放大倍數(shù)(如5,(略)×到(略),(略)×)?! 。?)拍照成(略)(如CCD或CMOS)采集圖像。可拍攝明場像、高(略)辨(略)電子衍射(SAED)用于晶體(略)析?! ?.4.5圖像處理與(略)析:使用(略)(如ImageJ、DigitalMicrograph、FIJI)進(jìn)行圖像增強(qiáng)、測量尺寸、標(biāo)注結(jié)構(gòu)等。(略)析細(xì)胞器形態(tài)、病毒顆粒、納米材料(略)布等。 1.5掃描電鏡: 1.5.1樣品制備 脫水:使用梯度乙醇或丙酮進(jìn)行脫水,每步(略)–(略)鐘,最后(略)%乙醇更換兩次?! ?.5.2干燥處理 冷凍干燥(Freeze-drying):快速冷凍后升華水(略),適用于某些特殊樣品?! ?.5.3樣品導(dǎo)電處理(鍍膜) ?。?)濺射鍍膜(SputterCoating):在樣品表面噴涂一層極薄的導(dǎo)電金屬: 材料:金(Au),厚度:(略)?nm,設(shè)備:離子濺射儀(IonSputterCoater)?! 。?)碳蒸鍍(CarbonCoating):用于需要進(jìn)行(略)素(略)析(如EDS)的樣品,避免金屬干 1.5.4樣品安裝 將處理好的樣品用導(dǎo)電膠(如碳膠或銀膠)固定在鋁制或銅制樣品臺上。確保樣品與臺面良好接觸,避免電荷積累?! ?.5.5上機(jī)觀察(SEM操作) ?。?)抽真空:將樣品臺放入樣品室,關(guān)(略)(機(jī)械泵+渦輪(略)子泵),降至(略)?3~(略)??Pa?! 。?)參數(shù)設(shè)置:加速電壓(kV):5–(略)kV(避免損傷),工作距離(WD):8–(略)mm。探針電流:根據(jù)樣品敏感度調(diào)節(jié)。放大倍數(shù):從低倍(×(略))逐步調(diào)至高倍(×(略),(略)+) ?。?)聚焦與對比度調(diào)節(jié):使用二次電子探測器(SEDetector)
獲取表面形貌圖像。調(diào)(略)聚焦、亮度和對比度,獲得清晰圖像?! 。?)拍照與保(略)采集圖像,記錄放大倍數(shù)、電壓、日期等參數(shù)?! ?.服務(wù)形式和要求 2.1測序 乙方向甲方可提供質(zhì)粒、菌液、PCR產(chǎn)物測序服務(wù),服務(wù)周期(略)小時(shí)-(略)小時(shí)并提交測序
數(shù)據(jù)給甲方,乙方保證每次正常的(略)L測序反應(yīng)能讀取不少于(略)堿基,若出現(xiàn)以下情況的乙方按對應(yīng)的處理方案解決?! ?.1.1對由于甲方樣品本身的原因如GCrich、連續(xù)單一重復(fù)堿基PolyA、PolyT及其它特殊結(jié)構(gòu)等造成測序反應(yīng)終止或信號驟降,如待測樣品中存在不止一個(gè)測序引物的結(jié)合位點(diǎn)而造成套峰現(xiàn)象等造成測序失敗或不能讀到(略)堿基的測序反應(yīng),乙方仍然正常收費(fèi)?! ?.1.2如遇到信號衰減的情況,乙方保證調(diào)(略)反應(yīng)條件再測一次,如測序結(jié)果沒有好轉(zhuǎn),則兩次按一次收費(fèi),如正常則對正常的一次收費(fèi)。 2.1.3對于不知原因的測序反應(yīng)沒有信號的樣品,乙方會至少進(jìn)行兩次實(shí)驗(yàn),如果仍然失敗,乙方會終止實(shí)驗(yàn)并通知甲方,不收費(fèi),甲方可以重新送樣測序。 2.1.4如遇無法判斷的原因?qū)е聼o法正確讀取所承諾的測序長度,雙方友好協(xié)商解決?! ?.2引物合成 2.2.1乙方按甲方要求提供的引物序列,為甲方合成引物并按要求提供引物實(shí)物及相應(yīng)的包裝,合成過程中雙方不可隨意更改引物序列。乙方收到甲方引物序列之日起,普通PCR引物合成則1-2個(gè)工作日內(nèi)交貨給甲方;熒光定量PCR引物合成、熒光標(biāo)記、兩端DNA修飾探針則4-5個(gè)工作日內(nèi)交貨給甲方,同時(shí)乙方向甲方提供其在完成引物合成過程中的實(shí)驗(yàn)報(bào)告及全部數(shù)據(jù)資料?! ?.2.2乙方保證合成質(zhì)量,合成序列準(zhǔn)確、純度合格。如果遇到甲方使用期間有任何問題,經(jīng)過乙方核實(shí),乙方將免費(fèi)重新合成一次,但不承擔(dān)額外補(bǔ)償?! ?.3HE染色服務(wù) 2.3.1甲方按照乙方要求提供樣品: 大小:建議0.5cm×0.5cm×0.3cm以內(nèi),過大影響固定效果。固定液:立即放入(略)%中性緩沖福爾馬林(Formalin),固定時(shí)間(略)–(略)小時(shí)(避免過度固定導(dǎo)致抗原丟失)。運(yùn)輸:常溫或4℃保存運(yùn)輸,避免凍結(jié)。標(biāo)記清晰:每個(gè)樣本需有唯一編號,并附送樣
清單。 2.3.2甲方收到樣品后按照乙方要求進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn): 包括:脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、HE染色、封片、顯微鏡觀察與拍照。在HE染色后提供全切片掃描,并進(jìn)行面積測量、陽性率統(tǒng)計(jì)等定量(略)析?! ?.4透射電鏡 2.4.1甲方按照乙方要求提供樣品: 大?。航ㄗh1mm3?左右(如1×1×0.5mm),過大影響固定滲透。固定液:立即投入2.5%戊二醛(溶于0.1M磷酸緩沖液或PBS,pH7.4)。固定時(shí)間:2–4小時(shí)(4℃),避免過度固定。清洗:用緩沖液漂洗3次,每次(略)鐘,去除殘留戊二醛。二次固定(可選):可再用1%鋨酸(OsO?)?固定1–2小時(shí)(增強(qiáng)膜對比度)。運(yùn)輸:4℃冷藏運(yùn)輸,避免凍結(jié)。使用防漏離心管,標(biāo)注“有毒”(含戊二醛或鋨酸)?! ?.4.2甲方收到樣品后按照乙方要求進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn): 對固定后的生物樣本進(jìn)行:脫水、包埋、超薄切片、染色、TEM觀察。交付染色后的切片,數(shù)字電鏡圖像(TIFFJPEG格式),典型視野照片(含標(biāo)尺),圖像(略)析報(bào)告(如粒徑(略)布、膜厚度測量等)?! ?.5掃描電鏡 2.5.1甲方按照乙方要求提供樣品: 大小:建議1mm3?左右。固定液:使用?2.5%戊二醛(溶于0.1M磷酸緩沖液或PBS,pH7.4)。固定時(shí)間:1–2小時(shí)(4℃),避免過度固定。清洗:用緩沖液漂洗3次,每次(略)鐘,去除殘留戊二醛?! ?.5.2甲方收到樣品后按照乙方要求進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn): 對固定后的生物樣本進(jìn)行:脫水、干燥、鍍膜、安裝、抽真空、成像、EDS(略)析、圖像處理與交付,交付數(shù)字化電鏡圖像(TIFFJPEG格式),典型視野照片(含標(biāo)尺和放大倍數(shù)),EDS譜圖,(略)析報(bào)告(如粒徑(略)布、(略)素組成等)。(略)查看原文